سیستم های تصویربرداری با وسترن بلات قبلاً برای اندازه گیری سیگنال های سنجش میکروپلیت پلاستیک سازگار شده اند. این می تواند یک اندازه گیری صرفه جویی در هزینه باشد زیرا سیستم های تصویربرداری با وسترن بلات تجهیزات آزمایشگاهی متداول هستند و در صورت عدم دسترسی به سیستم ، می توانند یک چراغ سنج اختصاصی را جایگزین کنند. یکی از محدودیت های قبلاً شناخته نشده این است که سیگنال های ضبط شده توسط دوربین ها در این سیستم ها برای همه چاه ها برابر نیستند. سیگنال ها به زاویه بروز دوربین و در نتیجه محل چاه روی میکروپلیت بستگی دارند. در اینجا ما نشان می دهیم:
• موقعیت یک چاه روی یک میکروپلیت به طور قابل توجهی سیگنال گرفته شده توسط یک سیستم تصویربرداری متداول وسترن بلات را از روش سنجش نورانی تأثیر می گذارد.
• اثر موقعیت چاه به راحتی قابل اصلاح است.
• این روش را می توان برای سنجش های درخشان تجاری در دسترس استفاده کرد ، و این امکان را برای اندازه گیری توان بالا از طیف گسترده ای از فرآیندهای بیولوژیکی و واکنشهای بیوشیمیایی فراهم می آورد.
قابل اعتماد و متخصص:
جزئیات روش
اطلاعات پس زمینه
سنجش های درخشان یک روش ساده ، حساس و پر توان برای اندازه گیری طیف گسترده ای از فرآیندهای بیولوژیکی ارائه می دهد. از آنجا که نور ساطع شده از سنجشهای درخشان نتیجه یک واکنش شیمیایی یا بیوشیمیایی است ، نسبت به سایر روشهای تشخیص سنجش مانند جذب یا فلورسانس منحصر به فرد پیچیده تر است. این روش ها به تجهیزاتی نیاز دارند که حداقل دارای منبع و سنسور نور باشند ، در حالی که برای تشخیص نور لامپ فقط به یک سنسور نیاز دارد. اینکه آیا یک سنجش گزارشگر مبتنی بر لوسیفراز برای مطالعه بیان ژن یا روش لومینو متر شیمیایی نور برای اندازه گیری واکنشهای بیوشیمیایی استفاده می شود ، به طور کلی تصور می شود که یک اسپکتروفتومتر که توانایی تشخیص سیگنال لومینسانس را دارد ، مورد نیاز است. گزارش های قبلی نشان داده اند که دستگاه های ارزان قیمت معمولی ، مانند تلفن های هوشمند ، می توانند جایگزین تجهیزات معمولی گران قیمت شوند [1] ، [2]. از سادگی اندازه گیری لومینسانس می توان استفاده کرد ، زیرا سایر تجهیزات ، از جمله دوربین های CCD ، می توانند نور ساطع شده از یک واکنش درخشان را به یک سیگنال دیجیتال برای تعیین کمیت تبدیل کنند. پیش از این نشان داده شده بود که یک سیستم تصویربرداری با وسترن بلات می تواند برای تشخیص و اندازه گیری قابل اعتماد سیگنال های درخشان سازگار باشد [3]. اگر استفاده از یک قطعه معمولی از تجهیزات آزمایشگاهی مانند این وجود داشته باشد ، در صورت عدم حضور یک لامپومتر اختصاصی می تواند ترجیح داده شود. اگرچه این روش دارای عملکرد قابل مقایسه با یک نور سنج اختصاصی است ، در هنگام اندازه گیری تعداد زیادی از چاه های میکروپلیت ، یا اگر چاه های اندازه گیری شده فاصله زیادی دارند ، منبع خطای دیگری معرفی می شود. همانطور که در شکل 1 نشان داده شده است ، ظاهر دوربین یک چاه میکروپلیت به زاویه بروز خود دوربین بستگی دارد. چاه هایی که در نزدیکی محور نوری لنز قرار گرفته اند نمای کاملی از محتوای چاه نشان می دهند ، در حالی که محتوای چاههای بیشتر از محور نوری تا حدی در یک طرف چاه مسدود شده و سیگنال از دیواره خلاف آن منعکس می شود. سمت. این خطای پرسپکتیو ، که از آن به عنوان اثر موقعیت نیز یاد می کنیم ، به دلیل لنز آنتوسنتریک مورد استفاده در دوربین های معمولی است. با تعویض عدسی entocentric با یک لنز telecentric می توان این اثر چاه را به صورت نوری از بین برد. برخلاف لنزهای تلسکوپی ، پرتوهای اصلی از یک شیء به موازات محور نوری لنزها هستند ، به معنای بزرگنمایی و چشم انداز بدون در نظر گرفتن فاصله عمود بر اشیاء با محور نوری سازگار است. قبلاً از لنزهای تله سانتریك برای تصویربرداریهای بیولوژیكی و كاربردهای سنجش استفاده شده است. سیستم به جای خرید یک چراغ سنج. در اینجا ما یک روش بهبود یافته از سنجش سنجش لومینسانس را با استفاده از یک سیستم تصویربرداری متداول ، اصلاح نشده ، وسترن بلات که برای این اثر موقعیت چاه اصلاح می کند ، ارائه می دهیم ، و با افزایش دقت اندازه گیری ها در یک میکروپلیت.
عکس. 1
در یک پنجره جداگانه باز کنید
عکس. 1
نمایش نمایه یکنواخت چاه ها از نرم افزار کسب. (الف) نمای قطعه ای از ریزگرد سیاه چاه 96. هر چاه حاوی مخلوط 2: 1 v: v از محلول شیمیایی و نور آنتی بادی ضد خرگوش کونژوگه شده با HRP (1: 8000 v: v در TBST) برای حجم نهایی 100 میکرولیتر است. (ب) نمای قطعه ای از میکروپلیت سیاه 384 چاه. هر چاه حاوی مخلوط 2: 1 v: v از محلول شیمیایی و نور آنتی بادی ضد خرگوش کونژوگه شده با HRP (1: 8000 v: v در TBST) برای حجم نهایی 40 میکرولیتر است. اثر چاه موقعیت در مقایسه چاه های مرکز با چاه های لبه یا گوشه مشهود است. جعبه های قرمز نمونه هایی از منطقه انتخاب شده برای اندازه گیری در نرم افزار کمیت است.
راه اندازی تجهیزات
یک میکروپلیت رنگ سیاه و سفید 96- یا 384 چاه کاستار روی سیستم عامل تصویربرداری با وسترن بلات (G: BOX ، Syngene ، Frederick، MD) قرار گرفت. با استفاده از نرم افزار اکتساب زنده ، میکروپلیت در مرکز دید دوربین قرار گرفت تا همه چاهها
نحوه استفاده از لومینو متر (میکروب سنج)
مقالات مشابه
- شرکت صادرات و واردات کالاهای مختلف از جمله کاشی و سرامیک و ارائه دهنده خدمات ترانزیت و بارگیری دریایی و ریلی و ترخیص کالا برای کشورهای مختلف از جمله روسیه و کشورهای حوزه cis و سایر نقاط جهان - بازرگانی علی قانعی
- منظور از بازسازی ساختمان چیست؟
- مدارک دریافت جواز کسب اتحادیه تعمیرکاران لوازم خانگی مشهد 6
- آخرین coronavirus شماره: Escambia County می افزاید: 7 جدید موارد در مجموع 689
- فلوریدا همچنان به فرار خود COVID-19 پرونده مرگ
- نکات مهم در طراحی رابط کاربری سایت به منظور بهینهسازی سئو
- شرکت صادرات و واردات کالاهای مختلف از جمله کاشی و سرامیک و ارائه دهنده خدمات ترانزیت و بارگیری دریایی و ریلی و ترخیص کالا برای کشورهای مختلف از جمله روسیه و کشورهای حوزه cis و سایر نقاط جهان - بازرگانی علی قانعی
- گیاه و زیست شناس اهدا 2020 مولکولی زیست جایزه
- شرکت صادرات و واردات کالاهای مختلف از جمله کاشی و سرامیک و ارائه دهنده خدمات ترانزیت و بارگیری دریایی و ریلی و ترخیص کالا برای کشورهای مختلف از جمله روسیه و کشورهای حوزه cis و سایر نقاط جهان - بازرگانی علی قانعی
- شیمی درمانی برای درمان کمتر از ۲۵٪ از افراد مبتلا به سارکوم موضعی ۸۸۸۰۱۱۰۰۰۱۱۰۸۸۸ استفاده می شودیافتهمحققان UCLA دریافته اند که شیمی درمانی معمولاً در هنگام درمان بزرگسالان با سارکوم موضعی، نوع نادری از سرطان بافت های نرم یا استخوان، استفاده نمی شود. در یک تحلیل سراسری از نزدیک به ۲۰۰۰۰ بیمار که سرطان شان هنوز به ارگان های دیگر گسترش نیافته بود، دانشمندان دریافتند که تنها ۲۲٪ با یک نوع شیمی درمانی درمان می شدند. محققان دریافتند که حتی در میان بیمارانی که بزرگترین و پرخاشگرانه ترین تومورها را داشتند، کمتر از نصف (45 درصد) شیمی درمانی دریافت کرد. تیم همچنین دریافتکه بیماران بیشتر احتمال دارد که با شیمی درمانی در امکاناتی که هر سال حداقل ۵۵ عمل جراحی برای سارکوم انجام می دهد، درمان شود، در مقابل افرادی که در امکاناتی که چنین جراحی هایی را انجام می دهد مراقبت دریافت می کنند. پس زمینه اگر چه کارشناسان در مورد سود شیمی درمانی برای افرادی که سارکوم موضعی شده اند بحث کرده اند، اما مطالعات متعددی از جمله یک کارآزمایی بالینی تصادفی شده اخیر نشان داده اند که شیمی درمانی می تواند بقای بیماران مبتلا به سارکومای بزرگتر و تهاجمی تر را طولانی تر کند. چون شیمی درمانی سلول های سرطانی را که شروع به فرار از تومور کرده اند و به جاهای دیگر مانند ریه ها یا کبد می روید هدف قرار می دهد، اغلب این تنها راه جلوگیری یا کاهش خطر گسترش سرطان است. اگر چه می تواند عوارض جانبی، مانند تهوع و ریزش مو، شیمی درمانی می تواند کمک به طولانی مدت بقا و یا حتی کمک به درمان بیماران بیماری شود. با این حال مطالعات دیگر، سود روشنی برای شیمی درمانی برای درمان سارکوم موضعی پیدا ننموده اند، بنابراین فقدان دستورالعمل های روشنی در مورد نقش، تعداد عوامل یا زمان بندی شیمی درمانی برای مدیریت سارکوم پرخطر در بزرگسالان وجود دارد. روش محققان با استفاده از پایگاه ملی سرطان، الگوهای مراقبت از 19969 بزرگسالی را که برای سارکوم بافت نرم پایه اولیه تحت عمل جراحی قرار گرفتند، از سال 2004 تا 2016 مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. تاثیر مطالعه نشان می دهد استفاده نامکرر از شیمی درمانی برای افراد مبتلا به سارکوم، به خصوص در مراکز درمانی که درمان کمتر افراد مبتلا به سارکوم، و آن را هموار راه را برای مطالعه آینده که در آن بیماران ممکن است بیشتر از شیمی درمانی به عنوان بخشی از درمان خود را برای سارکوم بهره مند شوند. نویسنده نویسنده اصلی این مطالعه دکتر دانیل گراهام، پزشک مقیم در انکولوژی جراحی در UCLA است. نویسنده ارشد دکتر آنوشا کالباسی، استادیار دانشگاه UCLA در بخش انکولوژی پرتوو عضو مرکز جامع سرطان یو سی ال ای جانسون است. نویسندگان دیگر دکتر میکلا اونیشچنکو، دکتر مارک اکاردت، دکتر بنجامین دی پاردو، دکتر اسکات نلسون، دکتر بارتوس چمیلوسکی، دکتر آرون سینگ و دکتر فریتز ایلبر، همه از UCLA؛ و دکتر سریرام ونیگالا و دکتر جیکوب شاباسون از دانشگاه پنسیلوانیا. مجله مطالعه در مجله شبکه ملی جامع سرطان منتشر شده است.88801100011088تحقیقات مختصری: محققان دانشگاه UCLA دریافتند که شیمی درمانی اغلب در هنگام درمان بزرگسالان مبتلا به سارکوم، نوع نادری از سرطان بافت های نرم یا استخوان، کمتر مورد استفاده قرار می گرفته است.